Gyllenstierna är en svensk-dansk adlig släkt. Ättens första med säkerhet kända stamfader är den av en förnämlig släkt varande riddaren Nils Eriksson till Aagaard på Jylland, nämnd i en handling från 1314.
Till Sverige kom ätten under förra hälften av 1400-talet med Nils Erikssons sonsons sonsons son, det svenska riksrådet Erik Eriksson till Fågelvik, som så småningom gifte sig med riksföreståndaren Karl Knutssons dotter, Kristina. I äktenskap fick han bland andra sonen Nils, fader till Kristina Gyllenstierna.
Riksdrotsen Nils Göransson upphöjdes 1569 i friherrligt stånd. En utdöd gren av den danska ätten introducerades efter Skånes införlivande på svenska riddarhuset. Vinstorpsgrenen blev friherrlig 1651; fyra grenar erhöll grevlig värdighet, men de är alla utdöda. I Danmark dog ätten ut år 1729.
Under huvuddelen av 1600-talet var ätten repressenterad i det svenska riksrådet. Den politik ättens medlemmar i regel förde var för kungligt envälde och reduktion, och mot högadeln som ätten, något motsägelsefullt, själv måste anses ha tillhört.
See also Gyldenstierne